AQP5在非小细胞肺癌细胞(NSCLC)中表达及其与细胞凋亡关系的研究

AQP5在非小细胞肺癌细胞(NSCLC)中表达及其与细胞凋亡关系的研究

作者:师大云端图书馆 时间:2019-08-23 分类:参考文献 喜欢:3320
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【摘要】目的:通过体内实验和体外实验的方法研究aquaporin5的表达及其与不同分化程度肺癌的关系。方法:对于肺癌组织,采用免疫组织化学的方法检测高、低分化程度的肺鳞癌和肺腺癌细胞AQP5的表达,采用TUNEL的方法检测高、低分化程度的肺鳞癌和肺腺癌细胞的凋亡指数。对于体外实验,采用全反式维甲酸诱导A549细胞形成高、低分化的肺腺癌细胞模型来进行AQP5的表达和凋亡关系的研究。采用MTT法测试A549的细胞增殖;采用PeriodicAcidSchiff染色和CEA的免疫组织化学的方法来鉴定细胞模型。采用免疫荧光的方法检测细胞模型的AQP5的表达,采用流式细胞术、Caspase3和Hoechst33342荧光染色来测试细胞模型的细胞凋亡指数。结果:对于肺鳞癌组织,高分化鳞癌的AQP5光密度(0,283±0,02)显著高于低分化鳞癌的AQP5光密度(0,219±0,05)(p<0.05);高分化肺鳞癌细胞的直径(27,02±0,83μm)显著高于低分化肺鳞癌细胞的直径(17,85±0,82μm)(p<0.05)。对于肺腺癌组织,高分化肺腺癌的AQP5光密度(0,281±0,03)显著高于低分化肺腺癌的AQP5光密度(0,238±0,02)(p<0.05).;高分化肺腺癌细胞的直径(13,60±0,82μm)显著低于低分化肺腺癌细胞的直径(28,01±1,01μm)(p<0.05)。高分化肺腺癌细胞的凋亡指数(20,20±2,40)显著高于低分化肺腺癌细胞的凋亡指数(18,53±1,73)(p<0.05)。相关分析检测结果显示:高、低分化肺腺癌细胞的AQP5表达与细胞凋亡指数之间呈显著正相关(高分化肺腺癌r=0.524,p=0.045;低分化肺腺癌r=0.661,p=0.007);高、低分化的肺鳞癌细胞的AQP5表达与细胞凋亡指数之间无显著相关关系(高分化鳞癌r=-0.069,p=0.807;低分化鳞癌,r=-0.299;p=0.279)。对于体外实验,全反式维甲酸以剂量依赖方式降低细胞的增殖,同时,AQP5的表达也依赖细胞的分化。Caspase3和流式细胞仪测试测试结果也呈现维甲酸的剂量依赖。AQP5表达的光密度和细胞凋亡指数(AI)的测试结果如下:对照组((MOD=1,29±0,14;AI=1,01%),5μg/ml组(MOD=1,31±0,15;AI=5,67%),10μg/ml组(MOD=1,32±0,10;AI=6,13%)and15μg/ml组(MOD=1,33±0,12;AI=7,15%)。A549的AQP5的表达与其凋亡指数呈显著正相关(r=0.970;p=0.0304)。结论:AQP5的表达无论是在体外还是体内均呈肿瘤类型和肿瘤分化程度的依赖。在高、低分化肺腺癌组织,随着AQP5表达的增加,其细胞凋亡也在增加;而在高、低分化鳞癌组织,AQP5的表达与其细胞凋亡之间无显著的相关性。腺癌的凋亡指数较鳞癌的高。在体外实验,全反式维甲酸能够促进A549细胞的分化、抑制其增殖和促进AQP5的表达,同时,促进A549的细胞凋亡。上述研究表明,AQP5的高表达能够促进肺腺癌的凋亡。
【作者】CHIBHABHAFIDELIS;
【导师】郝利铭;
【作者基本信息】吉林大学,人体解剖与组织胚胎学,2014,硕士
【关键词】水通道5;肺小细胞肺癌;凋亡;凋亡指数;

【参考文献】
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